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Blut spenden darf jeder zwischen 18 und 68 Jahren, soweit keine gesundheitlichen Bedenken vorliegen. In Österreich wurde im Juni 2008, in Deutschland Mai 2009[1] die obere Altersgrenze aufgehoben, sodass jeder über 18 spenden darf, falls sein Gesundheitszustand es zulässt[2]. In Österreich, Deutschland und der Schweiz gilt zudem für alle ein Mindestgewicht von 50 kg. Eine Blutspende kann bei gesunden Menschen bis zu sechsmal jährlich durchgeführt werden. Es ist eine Ruhezeit von jeweils zwei Monaten einzuhalten, drei werden empfohlen. In Österreich darf man laut Blutsicherheitsgesetz alle zwei Monate spenden. Dabei dürfen Frauen insgesamt nur viermal, Männer insgesamt sechsmal im Jahr spenden. Der Mindestabstand zwischen zwei Vollblutspenden beträgt sowohl in Deutschland als auch in Österreich 56 Tage (8 Wochen). In der Schweiz dürfen Frauen dreimal und Männer viermal pro Jahr im Abstand von mindestens 12 Wochen spenden. Problematisch sind etwa Tätowierungen und Piercings innerhalb der letzten vier Monate (6 Monate in der Schweiz), häufig wechselnde Sexualkontakte sowie intravenöse Drogenabhängigkeit, z.b. Heroin (wegen HIV) – HIV kann erst einige Wochen nach einer Infektion im Blut nachgewiesen werden. Tropenaufenthalte innerhalb der letzten sechs Monate (wegen tropischer Krankheiten). rein vorsichtshalber werden Blutspender abgelehnt, die sich zwischen 1980 und 1996 länger als 6 Monate in Großbritannien aufgehalten haben. Dies, obwohl der britische BSE-Skandal schon lange her ist und auch schon lange keine Briten mehr an der Creutzfeldt-Jakob-Krankheit erkrankten. Jeder Spender muss anonym angeben, ob sein Blut wirklich zum Spenden verwendet werden kann, z. B. durch Ankreuzen auf einem Zettel oder Anbringen eines Strichcode-Aufklebers. Auch wenn er dies vor der Spende angegeben hat, wird ihm trotzdem Blut abgenommen. Zum Beispiel kommt es vor, dass Gruppen (z. B. Pfadfinder) gemeinsam Blut spenden gehen. Wenn ein Spender einen Grund hat nicht zu spenden (z. B. weil er kürzlich ungeschützten Geschlechtsverkehr hatte), dies aber gegenüber anderen Gruppenmitgliedern nicht mitteilen möchte, dann kann er auf diese Weise anonym nach der Spende dafür sorgen, dass sein Blut nicht verwendet, d. h. nicht zur Bluttransfusion freigegeben wird. Mitunter ist noch eine Verwendung für wissenschaftliche Zwecke möglich. Dieses Verfahren dient dem bestmöglichen Schutz der Empfänger von Blutspenden. Ein Dilemma zwischen dem Sicherheitsbedürfnis des Empfängers, welcher auch auf die Ehrlichkeit des Spenders angewiesen ist, und dem Vertraulichkeitsbedürfnis des Spenders soll so vermieden werden. Zeitweise zurückgestellt werden etwa Spender, die vorübergehend erkrankt sind, bestimmte Medikamente einnehmen, zu Gruppen mit gewissen (potentiellen) gesundheitlichen Problemen gehören, die zeitweiligen Eisenmangel haben oder auch wenn es bei der Untersuchung des Blutes auf Erreger falsche Anzeigen („Fehlalarme“) gegeben hat, sogenannte falsch Positive. Unabhängig von etwaigem Risikoverhalten sind in Deutschland, Österreich und der Schweiz Männer, die Sex mit Männern haben, von der Blutspende ausgeschlossen. Siehe auch detaillierte Liste der Ausschlusskriterien bei der Blutspende.

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Spender müssen zwischen 18 und 68 Jahre alt sein und ein Körpergewicht von mehr als 50 kg haben. Mit besonderer ärztlicher Bescheinigung sind auch Spenden im Alter über 68 Jahre möglich. Alle Spender werden vor der ersten Spende einer ausführlichen ärztlichen Untersuchung einschließlich Anamneseerhebung und Labordiagnostik unterzogen. Bei Mehrfachspendern sind regelmäßige Kontrolluntersuchungen vorgeschrieben. Ausschlusskriterien nach den Richtlinien sind unter anderen bestimmte bestehende oder stattgehabte Infektionskrankheiten, bestehende oder in den letzten 6 Monaten stattgehabte Schwangerschaft, Alkoholkrankheit, Drogenabhängigkeit, schwere chronische Erkrankungen wie Herz- und Gefäßkrankheiten oder bösartige Tumoren.